Masson染色試劑盒的使用步驟有哪些?
更新時間:2023-11-20 點擊次數(shù):3661次
Masson染色試劑盒是用于組織切片染色的一種常用試劑盒,用于顯示膠原蛋白、肌纖維和纖維蛋白等成分。下面是
Masson染色試劑盒的使用步驟:
1、制備組織切片:首先需要獲取待染色的組織樣本,并將其固定、包埋和切片。確保切片厚度適當(dāng),通常為4-5微米。
2、石蠟去脫水:將切片從石蠟中除脫水,可以使用xylene或其他去脂劑進(jìn)行數(shù)次的浸泡。每次浸泡時間一般為3-5分鐘。
3、重脫水:將切片依次置入不同濃度的乙醇溶液中,進(jìn)行數(shù)次的重脫水。通常使用95%和100%乙醇,每次浸泡時間為2-3分鐘。
4、染色剝離:在實驗室通風(fēng)櫥中取出切片,放入染色剝離液中浸泡。染色剝離液的配制方法可參考試劑盒說明書。一般浸泡時間為10-15分鐘。
5、洗滌:將切片洗滌數(shù)次,以去除染色剝離液的殘留。使用蒸餾水或緩沖溶液進(jìn)行洗滌,每次洗滌時間約為1-2分鐘。
6.酸性紅染色:將切片置于酸性紅(pH2.5-3.0)中浸泡,一般浸泡時間為5-10分鐘,可以根據(jù)需要調(diào)整。酸性紅是用來染色膠原蛋白。
7、洗滌:將切片放入蒸餾水或緩沖溶液中洗滌數(shù)次,以去除多余的染料。
8、感光溶解:將切片置于感光溶解液中浸泡,一般浸泡時間為5-10秒鐘。感光溶解液有助于去除背景染色。
9、藍(lán)綠染色:將切片轉(zhuǎn)移到藍(lán)綠染色液中浸泡,時間通常為2-5分鐘。藍(lán)綠染色用于染色肌纖維和纖維蛋白。
10、洗滌:將切片放入蒸餾水或緩沖溶液中洗滌數(shù)次,以去除多余的染料。
11、去水:將切片依次置入不同濃度的乙醇溶液中,進(jìn)行數(shù)次的去水處理。通常使用70%、95%和100%乙醇,每次浸泡時間為2-3分鐘。
12、清潔劑洗滌:用清潔劑(例如xylene)進(jìn)行數(shù)次洗滌,以去除殘留的乙醇和其他雜質(zhì)。每次洗滌時間為2-3分鐘。
13、封片:最后將切片用透明膠片封裝,并使用合適的封片劑固定。