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β-gal 報(bào)告基因染色試劑盒

更新日期:2023-12-14

訪問(wèn)量:3698

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

所在城市:上海市

簡(jiǎn)要描述:
大腸桿菌中的LacZ基因編碼產(chǎn)物為β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal),β-gal較穩(wěn)定,能抵抗蛋白酶的水解,并可催化其底物X-gal產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,所以可以方便地檢測(cè)出LacZ基因的表達(dá)。因而,LacZ基因或β-gal常用來(lái)作為報(bào)告基因,檢測(cè)表達(dá)載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移表達(dá)效率,此外,也常用于基因啟動(dòng)子活性的研究。
品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

 

我公司的β-半乳糖苷酶(β-gal)報(bào)告基因染色試劑盒利用X-gal作為底物,配合試劑盒內(nèi)提供的其他試劑,可對(duì)固定后的細(xì)胞、組織冰凍切片中的β-gal進(jìn)行顯色,陽(yáng)性結(jié)果表現(xiàn)為藍(lán)色。

包裝清單:

產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格
SJ1233

β-半乳糖苷酶(β-gal)

報(bào)告基因染色試劑盒

100ML
說(shuō)明書一份

保存條件:

-20℃保存,一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品名稱編號(hào)名稱

β-半乳糖苷酶(β-gal)

報(bào)告基因染色試劑盒

SJ1233-A試劑A
SJ1233-B試劑B
SJ1233-C試劑C
SJ1233-D試劑D(X-gal)
SJ1233-E試劑E(10× PBS)

使用方法:

使用前先將10 × PBS用去離子水稀釋至1× PBS。

染色工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,配制方法如下:

名稱用量
試劑(A)25 ul
試劑(B)25 ul
試劑(C)25 ul
試劑D(X-gal)125 ul
試劑E(1× PBS)2.3 ml
總量2.5 ml

1、細(xì)胞樣品染色

1)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞處理完成后,用4%的多聚甲醛固定10分鐘后,用PBS洗三次,每次5分鐘,去除多余的PBS;

2)加入適量的染色工作液,放入37℃溫箱孵育1-24小時(shí)(35mm培養(yǎng)皿或6孔板一般使用1.5-2.0ml/皿(孔),其他規(guī)格的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板可依據(jù)培養(yǎng)面積的大小適量增加或減少染色液的量);

3)在顯微鏡下觀察,當(dāng)染成藍(lán)色的細(xì)胞顏色適中時(shí),去除染色液,用1× PBS洗三次。

4)加入適量1× PBS,鏡下觀察、拍照(染色后的標(biāo)本可在4℃保存一周)

2、組織冰凍切片染色

1)組織冰凍切片先用去離水洗滌3次,每次5分鐘,去除OCT膠;

2)用PBS洗滌切片3次,吸除PBS;

3)滴加染色工作液;

4)37℃孵育1-24小時(shí),直至切片中的細(xì)胞的顏色變藍(lán)。孵育過(guò)程最好在溫盒中進(jìn)行,以防止染色液蒸發(fā)。

 

5)吸除染色工作液,用PBS洗滌切片3次,每次5分鐘。  

6)水性封片劑封片后,鏡下觀察。染色后的標(biāo)本片在4℃可保存數(shù)天。

3、小組織塊染色

1)組織塊在4%的多聚甲醛固定液中充分固定后,用自來(lái)水沖洗盡量去除固定劑;

2)用PBS浸泡組織塊5-10分種;

3)將組織塊轉(zhuǎn)移至染色液中,37℃孵育1-24小時(shí)(染色液的用量盡量大于組織塊體積的10倍);

4)組織塊中出現(xiàn)藍(lán)色著色后,去除染色液,PBS洗滌三次,每次5分種。

5)對(duì)組織進(jìn)行拍照,或?qū)⒔M織塊進(jìn)行冰凍切片后鏡下觀察。 

注意事項(xiàng):

1、在石蠟包埋的過(guò)程中β-半乳糖苷酶可能失活,從而造成染色失敗,因此本試劑盒不建議用于石蠟切片的檢測(cè)。如果一定要用于石蠟切片的檢測(cè),建議自行對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行一定的優(yōu)化。

2、染色時(shí)間較長(zhǎng)時(shí),請(qǐng)?jiān)跍睾兄羞M(jìn)行,或是增加染色液的量,以防染色液蒸發(fā)變干。

   3、染色后應(yīng)及時(shí)觀察、拍照。放置過(guò)久由于藍(lán)色產(chǎn)物的擴(kuò)散,可能會(huì)出現(xiàn)部分假陽(yáng)性。

備注:

          產(chǎn)品信息可能會(huì)有優(yōu)化升級(jí),請(qǐng)以實(shí)際標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。

 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)

 

 為了您的安全和健康,請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程中做好防護(hù)工作。

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